知識 ミツバチのサンプル採取に使用される70%エタノールの主な機能は何ですか?DNAと病原体の完全性を確保する
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技術チーム · HonestBee

更新しました 3 days ago

ミツバチのサンプル採取に使用される70%エタノールの主な機能は何ですか?DNAと病原体の完全性を確保する


70%エタノールは、ミツバチのサンプル採取のために密閉容器で使用される場合、主に脱水、固定、および生物学的保存剤として機能します。ミツバチの組織に急速に浸透し、生物学的腐敗を直ちに停止させ、微生物の増殖を抑制し、サンプルが養蜂場から実験室への輸送中に安定した状態を保つことを保証します。

コアインサイト:70%エタノールは単なる保存液ではなく、サンプルの生物学的状態を固定する活性化学固定剤であり、分子診断のためのDNAの完全性を保護し、外部寄生虫を宿主に物理的に固定して正確な病原体数を確保します。

生物学的保存と固定

迅速な組織浸透

70%エタノールの有効性は、ミツバチの外骨格と組織に急速に浸透する能力に依存しています。

組織に迅速に浸透することで、採取直後に生物学的プロセスを停止させ、死後の自然な分解を防ぎます。

サンプル腐敗の防止

輸送中の常温環境では、生物学的サンプルは腐敗や細菌の過剰増殖を起こしやすいです。

エタノールは、微生物の二次増殖を抑制する環境を作り出し、実験室に届く標本が、腐敗したサンプルではなく、捕獲時のミツバチの状態を反映するようにします。

遺伝的完全性の保護

診断のためのDNA保存

分子診断を行う研究者にとって、エタノールの主な価値はDNAの完全性の保護です。

宿主ミツバチ(ミトコンドリアDNAを含む)と存在する病原体の両方の遺伝物質を保存し、PCRなどの分子実験の成功に必要な高品質のテンプレートを提供します。

酵素活性の阻害

生物学的分解は、細胞構造を分解する内部酵素によって引き起こされることがよくあります。

エタノールは、これらの酵素が輸送プロセス中に敏感な遺伝物質を分解するのを防ぐ、酵素活性を阻害する固定剤として機能します。

病原体検出の強化

外部寄生虫の固定

寄生虫調査、特にバロア寄生ダニの調査では、エタノールの固定特性が正確性のために不可欠です。

エタノールはサンプルを直ちに固定し、ダニが宿主から離れるのを防ぎます。これにより、後でボトルを機械的に振とうしてダニを分離し、正確に数えることができます。

顕微鏡形態の安定化

ノゼマのような腸内寄生虫の検出では、病原体の物理的構造が同定の鍵となります。

エタノールは、ノゼマ胞子の形態を安定化させ、顕微鏡での計数中に胞子が完全で認識可能なままであることを保証します。

運用上の考慮事項と限界

密閉容器の機能

エタノールはサンプルを保存しますが、密閉容器はこのシステムの機械的構成要素です。

ミツバチや病原体の偶発的な逃亡を防ぎ、エタノールの蒸発を防ぎ、化学分析を汚染する可能性のある外部汚染物質からサンプルを保護します。

生体試験との非互換性

分析のための保存と生体試験のための封じ込めを区別することが重要です。

エタノールは致死的な固定剤として機能するため、このように採取されたサンプルは、生きた生物学的活動や行動反応の観察を必要とする毒物学的試験には不向きです

目標に合わせた適切な選択

70%エタノールで採取されたサンプルの有用性を最大化するために、下流処理を保存方法に合わせてください。

  • 主な焦点が分子分析の場合:酵素活性を停止させ、宿主と病原体のDNAの完全性を保護するために、サンプルがすぐに完全に浸漬されていることを確認してください。
  • 主な焦点が寄生虫計数の場合:輸送中にバロア寄生ダニが付着したままであるようにエタノールに依存し、その後、実験室で機械的振とうを使用して分離し、正確な計数を行います。

エタノールは、野外条件と実験室の精度をつなぐ架け橋であり、生物を有用なデータポイントに変換します。

概要表:

機能 メカニズム 分析上の利点
生物学的固定 迅速な組織浸透 腐敗を停止させ、微生物の増殖を抑制する
遺伝子保存 酵素阻害 分子診断(PCR)のためのDNAの完全性を保護する
寄生虫の固定 即時の宿主固定 バロア寄生ダニの離脱を防ぎ、正確な計数を可能にする
形態安定性 構造的安定化 ノゼマ胞子が顕微鏡検査のために完全なままであることを保証する
封じ込め 密閉環境 蒸発を防ぎ、外部汚染を回避する

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参考文献

  1. Dylan Cleary, Allen L. Szalanski. Molecular Diagnostic Survey of Honey Bee, <i>Apis mellifera</i> L., Pathogens and Parasites from Arkansas, USA. DOI: 10.2478/jas-2022-0014

この記事は、以下の技術情報にも基づいています HonestBee ナレッジベース .

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