ミツバチダニ（Varroa destructor）のサンプリングにおける70%エタノールの使用は、即時の生物学的固定と分離のための化学的前処理という、重要な二重の機能を持っています。これにより、ミツバチとダニの両方が即座に殺され、サンプルの状態が保存されると同時に、正確な計数のために寄生虫と宿主の間の物理的な結合を弱める溶媒としても機能します。
中核的な要点 70%エタノールは単なる保存剤ではなく、ダニの跗節の接着を妨げる活性化学剤です。これにより、サンプルを振とうした際にダニが効率的に剥がれ落ち、偽陰性を防ぎ、感染率の正確な評価を保証します。
エタノールの二重の役割：固定と前処理
即時の生物学的固定
エタノール溶液の主な機能は、収集した瞬間のサンプルの状態を「固定」することです。
接触すると、アルコールは直ちにミツバチとそれらに付着しているダニを殺します。これにより、ダニの移動や逃亡を防ぎ、収集時点での感染レベルを正確に反映したサンプルが保証されます。
サンプル分解の防止
即時の固定を超えて、アルコールは保存剤として機能します。
これは、サンプルを分析前に輸送または保管する必要がある場合に不可欠です。エタノールはミツバチの生物学的分解を防ぎ、サンプルが研究所に届くまでその構造的完全性を維持します。
ダニ剥離のメカニズム
跗節の接着力の低下
エタノールを使用する最も技術的な利点は、ダニに対する物理化学的な作用です。
ミツバチダニは特殊な跗節パッドを使用してミツバチに付着します。エタノール溶液は、これらのパッドとミツバチの体表面との間の接着力を化学的に弱め、寄生虫の掴み方を効果的に緩めます。
表面張力の低減
エタノールは、収集容器内の流体力学を変化させます。
液体の表面張力を低減することにより、溶液はミツバチとダニの間への浸透を改善します。機械的な振とう（容器を振る）と組み合わせると、これにより、ダニが気泡に閉じ込められたり、摩擦で付着したままであったりするのではなく、物理的にミツバチから分離されることが保証されます。
溶出効率の最大化
エタノールを使用する最終的な目標は、「溶出効率」、つまりダニがミツバチから正常に洗い流される率を高めることです。
接着力が化学的に弱められているため、その後の振とうプロセスは大幅に効果的になります。これにより、最終的な計数に、そうでなければ隠れたまままたは付着したままだった可能性のあるダニが含まれることが保証され、統計的に正確な感染率が得られます。
運用上の考慮事項とトレードオフ
振とうの必要性
エタノールは結合を弱めますが、それ自体で全てのダニを能動的に除去するわけではありません。
ダニを剥がすには、依然として能動的な機械的振とう（容器を振る）が必要です。振とうなしで浸漬のみに頼ると、不正確な低い計数になります。
破壊的なサンプリング
この方法は、サンプルのミツバチ群に対して致死的です。
ミツバチが生存できる可能性のある「砂糖ロール」法とは異なり、エタノール洗浄は破壊的な検査です。少数の働きバチを犠牲にして、コロニーの健康状態を非常に正確に把握します。
視覚的確認
透明なプラスチック容器の使用は、化学プロセスをサポートする戦略的な選択です。
透明性により、研究者はエタノールの量がミツバチを覆うのに十分であること、およびサンプルが輸送中に損傷なく保持されていることを、シールを破って汚染のリスクを冒すことなく視覚的に確認できます。
目標に合わせた適切な選択
サンプリングプロトコルを設計する際は、コロニーの保存と比較した精度の優先順位を考慮してください。
- 主な焦点が最大限の精度である場合： 70%エタノール洗浄法を使用してください。これにより、化学的にダニの剥離率が最も高くなり、移動が排除されます。
- 主な焦点がコロニーの保存である場合： 砂糖ロールなどの非致死的な方法を検討してください。計数は化学洗浄よりもわずかに精度が低い可能性があることを受け入れてください。
- 主な焦点が遅延分析である場合： エタノール法に頼ってください。その保存特性により、フィールドでサンプルをバッチ収集し、後でラボで計数することができます。
化学的固定と機械的分離を組み合わせることで、エタノール洗浄はミツバチダニ感染の信頼性の高い定量化のための標準的な方法であり続けています。
概要表：
| 特徴 | ミツバチダニサンプリングにおける機能 | 結果への影響 |
|---|---|---|
| 生物学的固定 | ミツバチとダニを即座に殺す | ダニの移動と逃亡を防ぐ |
| 保存 | 生物学的分解を抑制する | 長期保管と輸送を可能にする |
| 化学溶媒 | ダニの跗節の接着力を弱める | ダニが宿主から容易に剥がれることを保証する |
| 表面張力 | 液体の表面張力を低下させる | 振とう中の溶出効率を改善する |
| 視覚的明瞭さ | 透明な容器で使用される | サンプルの完全性を確認できる |
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参考文献
- Fábio de Assis Pinto, Lídia Maria Ruv Carelli Barreto. Infestation rate of the mite Varroa destructor in commercial apiaries of the Vale do Paraíba and Serra da Mantiqueira, southeastern Brazil. DOI: 10.1590/1678-7264
この記事は、以下の技術情報にも基づいています HonestBee ナレッジベース .
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