ピン殺幼虫法は、ミツバチのコロニーの社会的免疫と衛生行動を定量的に評価するために使用される、精密な手作業による技術です。これは、細い昆虫ピンを使用して蓋をした幼虫の巣房を突き刺し、内部の幼虫を殺して感染をシミュレートし、次に働き蜂が死んだ組織をどれだけ早く検出し除去するかを測定することを含みます。
コアの要点 この方法は、「衛生行動」の定量化可能なベンチマークを提供します。これは、蜂が病気の幼虫を積極的に除去する遺伝的形質です。24時間にわたるコロニーの清掃速度を測定することにより、繁殖業者は、感染サイクルを効果的に断ち切ることによって、自然により病気に強い系統を選択できます。
アッセイに必要なツール
有効なピン殺幼虫テストを実施するには、データが標準化され、異なるコロニー間で比較可能であることを保証するために、特定のハードウェアが必要です。
高精度ピン
この方法の主なツールは、細い昆虫ピンまたは特殊なピン留めツールです。これらの針は、周囲の巣房壁への過度の構造的損傷を引き起こすことなく、ワックスの蓋を突き刺すのに十分な細さでなければなりません。
目標は、幼虫に「標準化された機械的損傷」を与えることです。これは、病気によって発生するであろう死をシミュレートし、蜂の清掃反応を引き起こします。
標準化された巣箱ハードウェア
正確なテストは、DadantまたはLangstrothモデルのような標準化された巣箱の使用に依存します。
これらの巣箱は、均一で取り外し可能なフレームを備えています。この構造により、技術者はコロニー全体を混乱させることなく、蓋をした幼虫の巣板を簡単に取り出して手作業で介入および観察できます。
記録機器
このテストは視覚的な比較に依存するため、写真記録機器がよく使用されます。
技術者は、ピン留め直後とテスト期間後にフレームを再度写真撮影します。これにより、いくつの巣房が清掃されたかの客観的なカウントが保証されます。
運用プロセス
このプロセスは、曖昧な観察を、コロニーの抵抗力の可能性に関するハードデータに変換するように設計されています。
1. フレームの選択
技術者は、蓋をした幼虫がいるフレームを巣箱から取り出します。
特定の発生段階（蛹または幼虫）の幼虫の領域を見つけることに焦点が当てられます。一貫した結果を得るためには、ここでの均一性が不可欠です。
2. 感染のシミュレーション（ピン留め）
細いピンを使用して、技術者は特定の数の巣房（例：50または100）の蓋を手作業で突き刺します。
ピンは、下の幼虫または蛹を殺すのに十分な深さまで貫通する必要があります。このアクションは、死んだまたは病気の幼虫の存在を模倣し、働き蜂に「均一な刺激」を作成します。
3. 24時間の清掃期間
幼虫が殺されたら、フレームはすぐに巣箱に戻されます。
コロニーは正確に24時間邪魔されずに放置されます。この期間中に、衛生的な働き蜂は蓋を通して死んだ幼虫を検出し、巣房の蓋を開け、残骸を除去する必要があります。
4. 定量的評価
24時間後、フレームが取り出され、再度検査（または写真撮影）されます。
空になった（清掃された）巣房の数が、ピン留めされた巣房の総数に対してカウントされます。高い割合（例：95％以上）を除去するコロニーは、衛生状態が良好で、繁殖に適していると見なされます。
トレードオフの理解
ピン殺法は中心的な技術ツールですが、他のアッセイ方法と比較した場合の限界を認識することが重要です。
労働集約性
バルク凍結法とは異なり、ピン殺法はすべての巣房に対して手作業での実行が必要です。
これは、大規模な運用には時間がかかることを意味します。すべての選択された幼虫が、巣を破壊することなく効果的に殺されることを保証するために、安定した手と忍耐が必要です。
可変刺激
幼虫の殺し方にわずかな一貫性のリスクがあります。
ピンが幼虫の vital organs を外した場合、幼虫は生き残るか、ゆっくりと死ぬ可能性があり、蜂の反応が遅れる可能性があります。これは、凍結殺幼虫アッセイよりも制御が難しい変数をもたらす可能性があります。
目標に合った選択をする
ピン殺幼虫法は強力なツールですが、その適用は特定の繁殖または研究目標に依存します。
- 主な焦点が小規模な繁殖である場合：この方法は、最小限の機器（ピンのみ）を必要とし、液体窒素や冷凍庫を購入せずに特定の女王蜂をテストできるため、理想的です。
- 主な焦点が高精度の研究である場合：この方法を使用して、検出および蓋開け行動に関する詳細なデータを収集します。機械的損傷は、蜂に非常に具体的なトリガーを提供するためです。
- 主な焦点が大規模な商業スクリーニングである場合：このプロセスは遅すぎると感じるかもしれません。数百のコロニーを迅速に評価する必要がある場合は、バルク凍結方法を調査することを検討してください。
最終的に、ピン殺法は、化学的治療ではなく遺伝学を通じてコロニーの健康を改善することを目指す繁殖業者にとって、最もアクセスしやすいエントリーポイントであり続けます。
概要表：
| ステップ/ツール | 詳細 | 目的 |
|---|---|---|
| 昆虫ピン | 高精度、細ゲージ針 | 幼虫の標準化された機械的殺傷 |
| フレームの選択 | 蓋をした幼虫（蛹/幼虫） | 清掃蜂への均一な刺激を保証 |
| ピン留めプロセス | 50-100巣房を突き刺す | テストのために病気の感染をシミュレート |
| 清掃期間 | 24時間のウィンドウ | 働き蜂が破片を検出し除去するための時間枠 |
| 評価 | 清掃された巣房の割合 | コロニーの衛生的な遺伝的形質を定量化 |
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参考文献
- Marcelo Lopes-da-Silva, L.C. Stefaniak. Honey Bees of Santa Catarina, Brazil, have only African mitochondrial DNA. DOI: 10.1590/s0102-09352012000200039
この記事は、以下の技術情報にも基づいています HonestBee ナレッジベース .
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