生物学的データの整合性を確保するため、ドローン幼虫サンプルを-20℃の産業用グレードのコールドチェーンで保管することが義務付けられています。この温度は、ミツバチの蛹と、存在する可能性のある寄生性のバロアダニの両方のすべての代謝および生物学的プロセスを直ちに停止させます。サンプルの生理学的状態を採取した正確な瞬間に「凍結」することにより、分解を防ぎ、輸送中および保管中の発生時計を止めます。
主なポイント -20℃保管の必要性は、コロニーの正確な「生物学的スナップショット」を保存することにあります。このディープフリーズがないと、ダニの継続的な発生と蛹の腐敗がダニの繁殖率（mVR）の計算を損ない、抵抗性分析を科学的に無効にしてしまいます。
生理学的スナップショットの保存
生物学的時計の停止
ドローン幼虫サンプルには、ミツバチの蛹とバロアダニという、2つの異なる生きた生物が含まれています。
どちらの生物も活発な生物学的時計を持っています。それらを-20℃で保管すると、即座に生物学的静止状態が作られます。これにより、実験室で分析する発生段階が、巣箱内に存在した段階と同一であることが保証されます。
採取後の発生の防止
サンプルがより暖かい温度で保管された場合、生物学的プロセスは継続します。
ダニは繁殖を続ける可能性があり、蛹は成熟を続ける可能性があります。この採取後の活動は、サンプルの現在の状態と、採取時のコロニーの実際の現実との間に不一致を生じさせます。
分析精度の確保
ダニ繁殖率（mVR）の計算
コロニーの害虫に対する抵抗性を決定する主要な指標は、ダニ繁殖率（mVR）です。
これを正確に計算するために、研究者は幼虫内の繁殖ダニと全ダニの比率を評価する必要があります。コールドチェーンが失敗した場合、輸送中にダニが繁殖サイクルを進める可能性があり、コロニーの感染レベルに関して偽陽性につながります。
平均蛹年齢の決定
正確な分析は、ダニの個体数増加とドローン蛹の特定の年齢との相関関係に依存します。
巣箱から除去された時点での蛹の正確な年齢を知る必要があります。ディープフリーズは蛹のさらなる老化を防ぎ、コロニーのタイムラインのベースラインデータを正確に保ちます。
トレードオフの理解
精度のコスト
産業用グレードのコールドチェーンの導入には、機器とロジスティクスへの多額の投資が必要です。
標準的な冷蔵では、生物学的活動を即座に停止するために必要な迅速かつディープな冷凍を達成するには不十分な場合が多いです。トレードオフは、科学的に正当化できるデータと引き換えに、運用コストが高くなることです。
コールドチェーン破損のリスク
解凍を許容する温度の変動は、生物学的分解または酵素活性を再開させる可能性があります。
一時的なコールドチェーンの障害でさえ、サンプルを危険にさらす可能性があり、自然なコロニーの状態と保管の人工物とを区別することが不可能になります。一貫性は目標温度と同じくらい重要です。
プロジェクトのデータ整合性の確保
保管プロトコルの厳格さを判断するために、最終的な目標を考慮してください。
- 主な焦点が科学研究または育種選抜である場合： mVR計算と蛹年齢データが抵抗性選抜に十分な精度であることを保証するために、-20℃の標準に厳密に従う必要があります。
- 主な焦点が基本的な存在/不在モニタリングである場合： わずかな逸脱を許容するかもしれませんが、繁殖率に関する定量的データは、おそらく歪んで信頼性が低くなる可能性があることに注意してください。
最終的に、コールドチェーンは単なる保管方法ではありません。それは時間を凍結し、分析がサンプルの腐敗ではなく、巣箱の現実を反映することを保証するためのツールです。
概要表：
| 特徴 | -20℃コールドチェーン保管 | 標準冷蔵/常温 |
|---|---|---|
| 生物学的状態 | 即時静止（生物学的時計停止） | 継続的な発生と腐敗 |
| データ精度 | 高 - 採取時の巣箱の現実を反映 | 低 - mVRで偽陽性につながる |
| ダニ繁殖 | 完全に停止 | 輸送中に継続する可能性あり |
| 蛹の整合性 | 正確な年齢決定のために保存 | 腐敗が年齢分析を歪める |
| 主なユースケース | 科学研究および育種選抜 | 基本的な存在/不在モニタリング |
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参考文献
- Regis Lefebre, Dirk C. de Graaf. Comprehensive Approach to Phenotype Varroa destructor Reproduction in Honey Bee Drone Brood and Its Correlation with Decreased Mite Reproduction (DMR). DOI: 10.3390/insects15060397
この記事は、以下の技術情報にも基づいています HonestBee ナレッジベース .